線粒體染色試劑盒檢測原理，L-谷氨酰胺是人體蛋白質(zhì)所必需的20種氨基酸之一。是人體內(nèi)zui普遍的、不可缺乏的條件性必需氨基酸，是構(gòu)成蛋白質(zhì)*的氨基酸之一，更是某些細(xì)胞培養(yǎng)中zui基本的元素。由于谷氨酰胺不穩(wěn)定的特性，在細(xì)胞培養(yǎng)基的整合中，易自發(fā)性分解為谷氨酸和氨離子，而氨離子對(duì)細(xì)胞的毒性很強(qiáng)，因此，在細(xì)胞培養(yǎng)體系中，須密切關(guān)注谷氨酰胺的儲(chǔ)存壽命（SHELF LIFE）和實(shí)時(shí)監(jiān)測。在谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的雙酶循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)中，L-谷氨酰胺首先發(fā)生脫氨基反應(yīng)，產(chǎn)生谷氨酸和氨離子。

 

  線粒體染色試劑盒細(xì)胞染色，貼壁細(xì)胞，在96孔板（100μL）或培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到70-80%融合度，在96孔板或培養(yǎng)皿內(nèi)添加等體積的染色工作液(步驟1.2)，在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細(xì)胞30分鐘-2小時(shí)。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同TRITC設(shè)置在顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察。注意：如果細(xì)胞沒有充分染色，可以適當(dāng)增加染料濃度或增加染色時(shí)間進(jìn)行改善。懸浮細(xì)胞: 在1000 rpm 條件下離心細(xì)胞培養(yǎng)液5分鐘，棄去上清，用預(yù)熱好的細(xì)胞培養(yǎng)液溫和的重懸細(xì)胞，然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2)在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細(xì)胞30分鐘-2小時(shí)。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同TexasRed設(shè)置在顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察。