久久77777,亚洲一区二区午夜福利精品精品,国产无码在线一区免,91.tva国产一区二区三区视频

免費咨詢熱線

021-50778506

技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁技術(shù)文章活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

更新時間:2024-08-09點擊次數(shù):1776

ROS也叫活性氧(reactive oxygen species)是細胞內(nèi)產(chǎn)生的一種具有氧化活性的化學物質(zhì),包括過氧化氫、超氧陰離子等。ROS在正常生理條件下也會產(chǎn)生,但當其產(chǎn)生過多或清除不足時,會對細胞造成氧化應(yīng)激,導(dǎo)致細胞損傷和疾病發(fā)生。

檢測原理

用于檢測細胞內(nèi)ROS廣泛采用的方法是DCFH-DA熒光探針法。DCFH-DA(二氯熒光黃雙乙酸鹽)是一種可指示的探針,其本身不具有熒光,但可以自由穿過細胞膜。一旦進入細胞,它會被細胞內(nèi)的酯酶水解成DCFH。由于DCFH無法穿過細胞膜,因此熒光探針會在細胞內(nèi)積聚。細胞內(nèi)的ROS能夠氧化無熒光的DCFH,生成有熒光的DCF,且熒光強度與ROS水平成正比。通過熒光顯微鏡、流式細胞儀或激光共聚焦顯微鏡等設(shè)備,在最大激發(fā)波長480nm和最大發(fā)射波長525nm下檢測熒光

檢測步驟

一、裝載探針

刺激時間較短(通常為2 h以內(nèi))的細胞:先裝載探針,后用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞。

刺激時間較長(通常為6 h以上)的細胞:先用活性氧陽性對照或自己感興趣的藥物刺激細胞,后裝載探針。

1、原位裝載探針(僅適用于貼壁細胞)

活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

2、收集細胞后裝載探針(適用于貼壁細胞和懸浮細胞)

活性氧ROS檢測原理及檢測步驟

二、檢測

原位裝載探針法:激光共聚焦顯微鏡直接觀察,或收集細胞后用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測。

收集細胞后裝載探針:用熒光分光光度計、熒光酶標儀或流式細胞儀檢測,也可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察。

注意事項

① 探針裝載后,一定要洗凈殘余的未進入細胞內(nèi)的探針,否則會導(dǎo)致背景較高。

② 探針裝載完畢并洗凈殘余探針后,可以進行激發(fā)波長的掃描和發(fā)射波長的掃描,以確認探針的裝載情況是否

良好。

③ 盡量縮短探針裝載后到測定所用的時間(刺激時間除外),以減少各種可能的誤差。

④ 根據(jù)結(jié)果顯示的整體熒光強度的高低,可以適當調(diào)整DCFH-DA探針的稀釋倍數(shù)以及孵育時間。


掃碼加微信

服務(wù)熱線

021-50778506

上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄

lsj0027@obiosh.com

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2023007219號-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

欧美一区二区天天干| 欧美.com日韩久久| 最新国三级三级在专区| 456第一页人妻| 九七午夜福利视频| 婷色综合av| 后入人妻aV| 久久久母乳期电影挤奶| 香蕉黄色三及片| 很很的操夜夜操| 久久国产热只有这里有精品| 自偷白柏亚洲| 久久少妇中文电影| 国产精品第3页| 无码 欧美 中文| 18禁美女网站aaaaa| 日本一道专区一区二区三区| 91人人视频白丝| 亚洲理论xxx人妻| 成人激情av五月天| 色综合久久久久久888| 黄片乱码新区| 艹逼视频不卡免费观看 | 午夜无码天堂| chaoporn亚洲free| 久久三级国| 高清综合欧美素人| 龙泉市| 国产一区五月天| 久久久 91| 色综合欧美综合网| 日韩一区二区三区情人| 99精品黄片| 日本久久精品人妻| 巨屌操女人逼视频| 亚洲精品国产20p| 天天干天天交天天射| 人妻少妇欧美日韩| 美女黄频在线观看| 中文字慕A一区二区| 在线免费日韩有码|