久久77777,亚洲一区二区午夜福利精品精品,国产无码在线一区免,91.tva国产一区二区三区视频

免費咨詢熱線

021-50778506

技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁技術(shù)文章鬼筆環(huán)肽染色原理(Alexa Fluor 488 標記鬼筆環(huán)肽使用方法)

鬼筆環(huán)肽染色原理(Alexa Fluor 488 標記鬼筆環(huán)肽使用方法)

更新時間:2024-10-15點擊次數(shù):1229

鬼筆環(huán)肽是一種雙環(huán)七肽毒素,它能選擇性的與動植物體內(nèi)的纖維狀的肌動蛋白 (F-actin) 結(jié)合,這種特殊的選擇性使之成為研究細胞內(nèi)肌動蛋白微絲 (F-actin) 的有力工具。在光學顯微鏡下, 熒光標記過的鬼筆環(huán)肽 (phalloidin-dye conjugate) 可以清晰地顯示出細胞內(nèi)微絲的形態(tài)和分布,廣泛被應(yīng)用于生物醫(yī)學的研究當中。

/ueditor/image/20241015/1728962033657394/AC18L032-Alexa Fluor 488 標記鬼筆環(huán)肽(綠色).jpg

鬼筆環(huán)肽染色原理

熒光標記的鬼筆環(huán)肽在納克水平就可與F-actin選擇性的結(jié)合并且易溶于水,為檢測組織切片,培養(yǎng)細胞和無細胞體系中的actin的定位和定量提供了非常方便的標記方法。通過其熒光特性,在特定波長光的激發(fā)下發(fā)出熒光,使得細胞內(nèi)肌動蛋白絲的結(jié)構(gòu)和分布清晰可見。
鬼筆環(huán)肽使用方法

以Alexa Fluor 488 標記鬼筆環(huán)肽(綠色)為例

第1:準備1× Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽工作液吸取1 μL 1000×Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽存儲液到1 mL 含有1% BSA的PBS緩沖液中即可得到1×工作液。

第2:細胞染色步驟

(1) 細胞培養(yǎng)過夜或更長,使其密度達到50~60% 匯合度。

(2) 吸掉培養(yǎng)液,37℃ 預熱的1×PBS(pH 7.4)清洗細胞2次。

(3) 使用含有3-4% 甲醛的PBS溶液進行細胞固定,室溫固定10~30 min。

(4) 室溫條件下,用PBS清洗固定好的細胞2~3次,每次10 min。

(5) (可選):室溫條件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化處理3~5 min,從而增加其通透性。

(6) 室溫條件下,用PBS清洗細胞2~3次,每次10 min。

(7) 每孔加入 Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽工作液100 μL /孔(96孔板),室溫避光染色20~90 min,夏季時間相對短些。

(8) 用PBS清洗細胞3次,每次5 min,去除掉多余的Alexa Fluor 488標記鬼筆環(huán)肽。

(9) (可選):加入足量的即用型DAPI溶液對細胞核進行復染,如:100 μL /孔(96孔板),室溫3~5 min。用PBS清洗細胞2次,每次5 min。

(10)  于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察,選擇Alexa FluorTM 488激發(fā)/發(fā)射濾片和/或DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454nm)。
鬼筆環(huán)肽注意事項

? 儲存條件:鬼筆環(huán)肽及其熒光標記衍生物應(yīng)儲存在-20℃以下,保持干燥并避光。

? 細胞處理:在進行鬼筆環(huán)肽染色前,細胞應(yīng)經(jīng)過適當?shù)墓潭ê蜐B透處理,以確保染色效果。

? 熒光顯微鏡設(shè)置:根據(jù)所使用的熒光標記鬼筆環(huán)肽的激發(fā)和發(fā)射波長,調(diào)整熒光顯微鏡的設(shè)置以獲得最佳的觀察效果。

? 不同的細胞染色情況不同,相應(yīng)Alexa Fluor鬼筆環(huán)肽使用量也需根據(jù)不同情況而定。

? 毒性較大,需帶上手套操作

? 避免固定劑中含有甲醇成分,因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。

488綠色鬼筆環(huán)肽產(chǎn)品推薦

[品牌]  和元李記

[產(chǎn)品]  488 標記鬼筆環(huán)肽(綠色)

[貨號]  AC18L032

[規(guī)格]   300T


掃碼加微信

服務(wù)熱線

021-50778506

上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄

lsj0027@obiosh.com

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2023007219號-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

亚洲 黄色 影院| 色369成人综合| 成人日b免费无码Av视屏| 亚洲不卡一区二区无线乱码| 欧美成人午夜精品免费| 日韩欧美一区二区三| 韩国两性视频网| 偷拍中文字幕在线| 蜜臀亚洲精品国产AⅤ| 97超碰在线精品屋| 欧美精品黄片-高清视频| 亚州精品视| 久久夜成人影片| 日本欧美福利一区| 后入人妻一区二区| 国产一区二区三区伦理视频住爱电影 | 男人天堂熟妇| 91欧美日韩国产综合| 看日韩日屄视频| aV嫩草一牛| 国产91一区二区不卡在线观看| 97国产成人一区二区三区| 欧美一级中文字幕免费在线| 用力抽插小穴流水视频无码| 一级无套黄久久| 欧美一级网在线观看| 黄色涩色色涩人妻| 青娱无码在线播放| 天堂AV综合| 国产精品欧美精品日韩| 激情影院欧美日韩| 蜜臀Av一区二区三区免费播放| 玖玖精品视频| 欧美日国一级片| 狠狠干男人的天| 精品一区二区三区立花| 欧美激情在线视频播放一区| 偷拍激情小视频久久| 国产在线/欧美| 美女脱了内裤张开腿让男人桶网站| 视频看看一区二区不卡|