久久77777,亚洲一区二区午夜福利精品精品,国产无码在线一区免,91.tva国产一区二区三区视频

免費咨詢熱線

021-50778506

技術文章

TECHNICAL ARTICLES

當前位置:首頁技術文章CFDA, SE 細胞增殖示蹤熒光探針檢測原理與注意事項

CFDA, SE 細胞增殖示蹤熒光探針檢測原理與注意事項

更新時間:2025-01-08點擊次數:793

CFDA-SE可用于細胞示蹤,也可用于細胞增殖檢測。經CFDA-SE標記的細胞可用于體外和體內增殖研究,且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA-SE常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可用于成纖維細胞,自然殺傷細胞,造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。

檢測原理

CFDA SE可以通過完好的細胞膜,進入細胞后被細胞內的酯酶催化分解成CFSE。CFSE可以隨機地、不可逆地和細胞內蛋白的賴氨酸殘基或其它氨基發(fā)生結合反應,并標記這些蛋白,CFDA-SE標記細胞呈綠色熒光。CFDA-SE標記的分裂細胞每分裂一次,子代細胞的熒光會減弱一半,分裂一次的細胞熒光強度減半(1/2),分離兩次的細胞熒光強度再減半(1/4),以此類推,熒光強度按照1/2,1/4,1/8,1/16的規(guī)律逐漸遞減。

使用方法

1、保存液配制(5 mM)

   按需配制,如取DMSO 360 μL,溶解1 mg CFSE,超音波溶解,得到5 mM CFSE保存液,將其按40 μL體積分裝于避光的無菌凍存管中,-20℃可保存2個月。

2、工作液配制

   取 5mM 的CFSE稀釋液1μL,加入1mL10%FCS的PBS稀釋。

3、染色

   (1) 重懸細胞。用有5% FCS的PBS重懸細胞,細胞濃度一般為1x1x10^6/mL(體外實驗)或1x1x10^7/mL(轉染實驗)。

   (2) 染色。1mL DFSE工作液與1mL細胞懸液混合后37℃孵育5~10 min。期間輕輕混勻2次。

   (3) 終止染色。用完培養(yǎng)液洗滌3次并離心。一般在第2次洗滌后再孵育5 min后進行第3次洗滌。冰冷的含10% 新生牛血清、RPMI-1640 medium(含L-谷氨酰胺)(貨號:AC01L064),輕輕混勻1 min(用手輕彈,切忌吹打),1500 r/min 離心5 min。

(4) 流式細胞儀在FL1通道檢測。

注意事項

 ? 所有試劑在使用前均需解凍、混勻,混勻過程中盡量避免產生氣泡;CFDA SE溶劑在較低溫度下會凝固,請于20-25℃水浴片刻至全部融化后再使用。

 ? 試劑中含有熒光染料,保存或進行標記時盡量避光操作,以避免熒光淬滅問題。

 ? 不同細胞的內酯酶活性不同,因此染色效果具有差異性??筛鶕毎愋图芭囵B(yǎng)條件摸索最佳工作濃度。

 ? 若需要對細胞進行固定,請用醛類固定劑如3.7%多聚甲醛于室溫固定15 min;之后若還需要進行其他如抗體標記,請用冰丙酮透化處理細胞10min。

 ? 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

掃碼加微信

服務熱線

021-50778506

上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄

lsj0027@obiosh.com

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術有限公司 All Rights Reserved    備案號:滬ICP備2023007219號-1

技術支持:化工儀器網    管理登錄    sitemap.xml

99成人三级片| 啪视频在线免费观看| 欧美毛片一区二区三区有限公司| 老湿机免费午夜| 性亚洲视频天天射国产精品| 欧美小说区偷拍区| 久久人人aV| av综合色色中文| 日本欧美性| 一a级成人网| 欧美日韩偷| 精品在线视频韩| 久久久久国产精品日韩欧美| 九九热在线看免费视频| A级毛片无码久久精品免| Ww视频久久| 亚洲成人午夜网站免费| 激情人妻字幕| 天堂资源在线8MAV| 国产鸡巴操大逼9919| 麻豆激情无套内射| 毛色毛片一区二区| 丁香五月成人社区久久丫| 后入俄罗斯少妇二区| 日韩情侣自拍偷拍视频| 亚洲欧美色偷拍| 人体美腿熟女丝袜一区二区| 欧美舒服在线| 二区国产三区日韩欧美一区| 欧美激情一区二区激情视频| 欧美亚洲日韩中文在线| 久久久精品高潮| 精品人妻日日| 97字幕在线中文| 本黄色电影久久| 2014AV一区二区| 亚洲色婷五月天| 欧洲日韩精品麻豆久久久久久| 欧美国产一区综合在线| 殴美色成人综合网| 伦理片精品午夜久久久精精品www|