久久77777,亚洲一区二区午夜福利精品精品,国产无码在线一区免,91.tva国产一区二区三区视频

免費(fèi)咨詢熱線

021-50778506

產(chǎn)品中心

PRODUCTS CENTER

當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心蛋白與免疫蛋白制備AP01L034RIPA裂解液(弱)

RIPA裂解液(弱)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

RIPA裂解液(弱),是一種經(jīng)典的動(dòng)物組織/細(xì)胞快速裂解液,通過組合離子型去垢劑和非離子去污劑對(duì)組織細(xì)胞的消化作用使組織細(xì)胞崩解釋放出蛋白質(zhì),對(duì)細(xì)胞膜、胞漿亞組分、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用。李記生物 RIPA 裂解液(弱) 不含 PMSF 組分;適用于 PAGE、Western Blotting 和免疫沉淀(IP)的研究。

產(chǎn)品型號(hào):AP01L034
更新時(shí)間:2025-06-08
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:1132
詳細(xì)介紹在線留言
品牌Life-iLab/李記生物貨號(hào)AP01L034
規(guī)格100ml供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述
RIPA (Radio Immunoprecipitation Assay)裂解液,是一種經(jīng)典的動(dòng)物組織/細(xì)胞快速裂解液,通過組合離子型去垢劑和非離子去污劑對(duì)組織細(xì)胞的消化作用使組織細(xì)胞崩解釋放出蛋白質(zhì),對(duì)細(xì)胞膜、胞漿亞組分、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用。李記生物 RIPA 裂解液(弱) 不含 PMSF 組分;適用于 PAGE、Western Blotting 和免疫沉淀(IP)的研究。
訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱貨號(hào)規(guī)格
RIPA 裂解液(弱)AP01L034100mL

運(yùn)輸與保存
常溫運(yùn)輸。4℃保存,有效期 12 個(gè)月。
配方表
25mM Tris•HCl, 150mM NaCl, 1% NP-40, 0.25% sodium deoxycholate,pH 7.6
使用方法
貼壁細(xì)胞
1. 取適量裂解液,加入蛋白酶抑制劑混合物(100×,不含 EDTA) (貨號(hào):AP02L084) 或 PMSF(終濃度為
1 mM,但 PMSF 不足以抑制所有蛋白酶活性)。
2. 去除細(xì)胞培養(yǎng)液,用預(yù)冷的 PBS 洗滌兩次。按照 6 孔板每孔加入 150-200ul 的裂解液的比例均勻加
入裂解液,如果細(xì)胞密度過高可增加裂解液的量至 250-300 uL。【注】:裂解液過少會(huì)使細(xì)胞裂解不
充分,影響蛋白提取的質(zhì)量。
3. 用槍吹打數(shù)下,冰上放置 10 min,期間每隔 2 min 用槍吹打數(shù)下。
4. 轉(zhuǎn)移細(xì)胞裂解液于 1.5 mL EP 管中。
5. 12,000 g,4℃ 離心 5min。
6. 收集上清。
懸浮細(xì)胞
1. 取適量裂解液,加入蛋白酶抑制劑混合物(100×,不含 EDTA) (貨號(hào):AP02L084) 或 PMSF(終濃度為
1 mM,但 PMSF 不足以抑制所有蛋白酶活性)。
2. 收集細(xì)胞 0.5~2×107于 1.5mL 離心管中,1mL 預(yù)冷的 PBS 洗滌兩次,1,000xg 離心 3 min,棄上清,
重復(fù)三次。
3. 按照 6 孔板每孔加入 150-200uL 的裂解液的比例均勻加入裂解液,如果細(xì)胞密度過高可增加裂解液的
量至 250-300uL?!咀ⅰ浚毫呀庖哼^少會(huì)使細(xì)胞裂解不充分,影響蛋白提取的質(zhì)量。
4. 用槍吹打數(shù)下并劇烈震蕩,冰上放置 10 min,期間每隔 2 min 震蕩一次。
5. 12,000 g,4℃ 離心 5 min。
6. 收集上清。
組織樣品
1. 把組織jian成細(xì)小的碎片。
2. 取適量裂解液,加入蛋白酶抑制劑混合物(100×,不含 EDTA) (貨號(hào):AP02L084) 或 PMSF(終濃度為
1 mM,但 PMSF 不足以抑制所有蛋白酶活性)。
3. 按照每 100mg 組織加入 1mL 裂解液的比例加入裂解液(如裂解不充分可適當(dāng)增加裂解液,如果需要
增加蛋白濃度可適當(dāng)減少使用的裂解液體積)。
4. 用勻漿器勻漿,直至充分裂解(為防止蛋白降解請(qǐng)于冰上操作)。
5. 12,000 g,4℃ 離心 5 min。
6. 收集上清。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 如需檢測(cè)磷酸化蛋白,則需要額外添加磷酸酶抑制劑 II cocktail(50×)(貨號(hào):AP03L025) 。
3. RIPA 裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組 DNA
等的復(fù)合物。在不檢測(cè)基因組 DNA 結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);
如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心
取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,例如 NF-kappaB、p53 等時(shí),通常不必進(jìn)行超
聲處理,就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。
4. RIPA 裂解液(弱)含有較高濃度的去垢劑,不能用 Bradford 法測(cè)定蛋白。
5. 如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。
然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使
用勻漿器那樣裂解得比較充分。
6. 通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 μL 裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量
到 200 μL 或 250 μL。

表 1: RIPA 裂解液的使用量

樣品來(lái)源培養(yǎng)容器收獲細(xì)胞數(shù)RIPA 用量可制備樣品數(shù)
細(xì)胞6 孔板2.5 x 10^6150-250 μL400~600
60 mm 培養(yǎng)板5.2 x 10^6300-500 μL200~300
90 mm 培養(yǎng)板12.2 x 10^6500-1000 μL100~200
25 cm2培養(yǎng)瓶5 x 10^6300-500 μL200~300
75 cm2培養(yǎng)瓶2 x 10^71000-2000 μL50~100
組織20 mg 組織塊2.5 x 10^6150-250 μL400~600

相關(guān)產(chǎn)品推薦
EZ ECL pico 化學(xué)發(fā)光液(超敏型)(貨號(hào):AP34L024)
BCA 蛋白定量試劑盒(貨號(hào):AP12L025)

本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。



Order

在線留言

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7

掃碼加微信

服務(wù)熱線

021-50778506

上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄

lsj0027@obiosh.com

Copyright © 2025和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 All Rights Reserved    備案號(hào):滬ICP備2023007219號(hào)-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登錄    sitemap.xml

av在一起大香蕉| 91熟女口爆| 噜噜噜噜噜无码| 午夜深爱网| 老女人老熟女一区| 看美女操大BB| 欧美专区 精品欧美| 国产 欧美 阴蒂| 最新精品三级91在线播放| 天天摸天天做天天爽水多 | 色妹子久久精品综合| 色呦呦在线视频超清视频播放| 一级王色A| 殴美激情生活网| 国产免费av综合片在线观看| 国产午夜福利免费92视频| 中国夫妻性爱一级片| 美女网站视频黄色的| 无码人妻视视频网站洋洋| 天天爽天天狠天天干| 久久久久久久综合-91熟女老熟女 亚洲久久一区二区视频 | 国产亚欧无码在线观看| 国产无码操屄视频10| 激情Av操| 亚无码在线视频tc| 日韩精品入口久久久| 熟女精品久爱| 精品国产欧美偷拍盗摄一区二区 | 制服丝袜中文字幕亚洲区在线资源| 伊人在线精品视频| 国产精品自偷一区| 偷拍网欧美| 国产中文字幕久久久久| 日韩传媒av| 国产精品露脸才是真的| 日本午夜精品一区二区三区| 强奸色婷婷蜜桃乱伦AV| 大奶成人综合网| 日韩五月天婷婷AV| 一本到高清无码中文| 亚洲中文不卡视频|